アセチルグルコサミニダーゼは、腎臓の損傷や尿細管を検出するための感度の高いマーカーです。また、尿路感染症の検査や糖尿病性腎症の早期診断にも使用できます。臨床的意義は通常、病的な状態で現れます。他の検査が正常で、アセチルグルコシダーゼ値が高い場合は、減塩、低脂肪、高ビタミンの食事、禁煙、禁酒が推奨されます。次に、アセチルグルコサミダーゼの役割や注意すべき点、確認方法について詳しく見ていきましょう。 β-N-アセチルグルコサミニダーゼ検査の正常値 1. p-ニトロフェノール比色法:血清NAG 21.54±6.4U/L、尿中NAGは正規分布を示し、中央値は9.13U/gクレアチニン、95パーセンタイルの上限は16.10U/gクレアチニンでした。 2.蛍光分光法: 成人血清:9.94±2.07U/L。 成人尿:6.39±3.19U/LCre。 β-N-アセチルグルコサミニダーゼ検査の役割 血液および尿中の NAG 活性測定は、腎実質病変、特に急性損傷および活動性病変に対してより敏感であり、主に早期の腎障害および疾患観察のモニタリングに使用されます。 1.腎尿細管疾患 重金属(水銀、鉛、カドミウムなど)や薬剤誘発性の腎障害、虚血、低酸素症、失血、ショックなどにより、NAG 活性が上昇する可能性があります。 2.ネフローゼ症候群の患者では、尿中NAGが著しく増加し、寛解時に減少し、再発時に急激に上昇することが多いため、臨床観察の指標として使用できます。糸球体腎炎の急性期の変化は大きいですが、尿細管障害と比較すると変化は小さくなります。 3.尿路感染症の局在診断:急性および慢性腎盂腎炎における尿中NAGの上昇は単純性膀胱炎との区別に有効です。上部尿路感染症の早期診断に使用できます。 4.腎移植拒絶反応のモニタリング:NAG は腎移植拒絶反応の初期段階で上昇することがあり、尿タンパク質、血清クレアチニン、クレアチニンクリアランスよりも感度が高くなります。 5.糖尿病性腎症の早期診断:糖尿病性腎症における尿中NAGの上昇は、尿中アルブミンやβ2ミクログロブリンの上昇よりも、病気の早期診断に適しています。 β-N-アセチルグルコサミニダーゼ値が高い場合の可能性のある疾患:ネフローゼ症候群、尿路感染症 β-N-アセチルグルコサミニダーゼ検査で注意すべきこと (1)パラニトロフェノール比色法: ①マトリックスp-ニトロフェノールは調製前に精製し、50℃で24時間乾燥する必要があります。 10mmol/L NaOHを使用して濃度を0.04mmol/Lにし、狭帯域分光光度計で吸収曲線をスキャンします。λmax=401nm、IFCC規格に準拠、Aλmax=0.7316~0.7388、Eλmax=18380±90(25℃)。 ②基質は溶解性が低いため、調製する際には、まず適量のpH4.6緩衝液でペースト状に調整し、その後緩衝液を必要量まで徐々に加える。 ③測定結果が直線範囲を超える場合は、検体を生理食塩水で希釈して再測定し、結果に希釈倍率を掛ける。 ④尿素酵素濃度は尿量に大きく影響されるため、24時間尿量を採取する必要があります。 NAG/gクレアチニン比で酵素排泄率を計算すれば、尿の濃縮や希釈の影響を受けず、24時間尿を貯留する必要もありません。 (2)蛍光分光法: ①尿の色に影響されず感度の高い蛍光法によるNAG測定キットが国産で販売されています。 ②上海第三分析機器工場製の930蛍光光度計(励起フィルター360、発光フィルター(400+450)複合)も使用でき、満足のいく結果が得られます。 ③本法の酵素反応溶液中の各成分の濃度は、基質1.33mmol/L、クエン酸20mmol/L、Na2HPO4 32mmol/Lである。 ④試薬調製に使用する溶媒は再蒸留水を使用し、基質には遊離4-MUが含まれず、酵素はBSA中に存在しないか、50℃で2時間加熱して不活性化する必要があります。 ⑤血清中のNAGは4℃で数時間から数日間、-20℃で数ヶ月間安定です。尿検体は 4°C で 1 週間安定しており、クエン酸抗凝固血漿で処理することもできます。 ⑥ β-N-アセチルグルコサミンは、β-N-アセチルグルコサミンシダーゼ(EC 3.2.1.30)とβ-N-アセチルグルコシダーゼ(EC 3.2.1.52)の2つの酵素によって加水分解されます。精製酵素はEC 3.2.1.30またはEC 3.2.1.52に限定されます。厳密に言えば、国内の文献でよく言及される NAG は、基質に対する酵素の特異性を指すのではなく、使用される基質にちなんで命名されています。そのため、現在では海外の文献ではβ-N-アセチルグルコサミニダーゼと呼ばれることが多いです。 β-N-アセチルグルコサミニダーゼ検査方法 (1)パラニトロフェノール比色法:波長405nm、光路長1cmで混合し、蒸留水で光をゼロに調整する。各チューブの吸光度を読み取り、その差(AU-AC)を使用して標準曲線を確認する。 ①マトリックスp-ニトロフェノールは調製前に精製し、50℃で24時間乾燥する必要があります。 10mmol/L NaOHを使用して濃度を0.04mmol/Lにし、狭帯域分光光度計で吸収曲線をスキャンします。λmax=401nm、IFCC規格に準拠、Aλmax=0.7316~0.7388、Eλmax=18380±90(25℃)。 p-ニトロフェノールのモル吸光係数によると ②基質は溶解性が低いため、調製する際には、まず適量のpH4.6緩衝液でペースト状に調整し、その後緩衝液を必要量まで徐々に加える。 ③測定結果が直線範囲を超える場合は、検体を生理食塩水で希釈して再測定し、結果に希釈倍率を掛ける。 ④尿素酵素濃度は尿量に大きく影響されるため、24時間尿量を採取する必要があります。 NAG/gクレアチニン比で酵素排泄率を計算すれば、尿の濃縮や希釈の影響を受けず、24時間尿を貯留する必要もありません。 (2)蛍光分光法:まず、血清または尿をウシ血清アルブミン(BSA)を含まない緩衝液で20倍に希釈する。 よく混ぜ、励起波長を364nm、発光波長を448nmに設定し、停止溶液でゼロに調整し、6μmol/L 4-MUチューブの蛍光強度を100に調整し、ブランクチューブと測定チューブの蛍光強度をそれぞれ測定します。 ①尿の色に影響されず感度の高い蛍光法によるNAG測定キットが国産で販売されています。 ②上海第三分析機器工場製の930蛍光光度計(励起フィルター360、発光フィルター(400+450)複合)も使用でき、満足のいく結果が得られます。 ③本法の酵素反応溶液中の各成分の濃度は、基質1.33mmol/L、クエン酸20mmol/L、Na2HPO4 32mmol/Lである。 ④試薬調製に使用する溶媒は再蒸留水を使用し、基質には遊離4-MUが含まれず、酵素はBSA中に存在しないか、50℃で2時間加熱して不活性化する必要があります。 ⑤血清中のNAGは4℃で数時間から数日間、-20℃で数ヶ月間安定です。尿検体は 4°C で 1 週間安定しており、クエン酸抗凝固血漿で処理することもできます。 ⑥ β-N-アセチルグルコサミンは、β-N-アセチルグルコサミンシダーゼ(EC 3.2.1.30)とβ-N-アセチルグルコシダーゼ(EC 3.2.1.52)の2つの酵素によって加水分解されます。精製酵素はEC 3.2.1.30またはEC 3.2.1.52に限定されます。厳密に言えば、国内の文献でよく言及される NAG は、基質に対する酵素の特異性を指すのではなく、使用される基質にちなんで命名されています。そのため、現在では海外の文献ではβ-N-アセチルグルコサミニダーゼと呼ばれることが多いです。 β-N-アセチルグルコサミニダーゼ検査にはいくらかかりますか? 専門分野: 泌尿器科検査分野: 生化学検査 適用性別:男性と女性の両方に適しています断食の有無:断食 β-N-アセチルグルコサミニダーゼ検査参考価格:10~60元 |
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