グラム染色の手順は何ですか?

グラム染色法が何であるか知らない人が多いでしょう。グラム染色法は細胞診でよく使われる分化染色法です。1884年にデンマークの医師が発明した毛髪の再染色法で、一次染色、媒染、脱色、再染色の4つのステップに分かれています。グラム染色法の手順を知らない人も多いと思います。以下で紹介します。グラム染色の手順。

まず、グラム染色の手順は何でしょうか?操作手順: 培養したさまざまな細菌の塗抹標本を作成し (塗抹標本が厚くなりすぎないように注意)、乾燥させて固定します。固定するときは、スライドを炎に1〜2回通します。過熱しないように注意してください。スライドは触れないほど熱くなってはいけません。

染色（１）初期染色は、シュウ酸に溶かしたクリスタルバイオレットを１滴滴下し、１分程度放置した後、水で洗い流す。

（２）媒染剤にヨウ素液を加えて残った水を洗い流し、蓋をして１分ほど置いた後、水で洗い流します。

3) 脱色: スライド上の水を振り落とし、白い背景に置きます。95% アルコールで、アルコールが紫色に変色しなくなるまで、約 20 ～ 30 秒間洗浄します。すぐに水でアルコールを洗い流します。 （4）サフラニン溶液で1〜2分間再染色し、水で洗い流します。

（５）乾燥後、油浸顕微鏡で観察します。グラム陰性菌は赤色に、グラム陽性菌は紫色に見えます。分散した細菌のグラム染色反応が標準として使用されます。細菌が密集しすぎると、偽陽性の結果が出ることがよくあります。

6) 同じ方法を使用して、グラム染色の比較のために、ガラススライド上に大腸菌と枯草菌の混合スライドを準備します。グラム染色の鍵は、アルコール脱色の程度を厳密に制御することです。脱色が過剰だと陽性細菌が誤って陰性細菌として染色される可能性があり、脱色が不十分だと陰性細菌が誤って陽性細菌として染色される可能性があります。さらに、細菌の年齢も染色結果に影響します。陽性細菌の培養期間が長すぎたり、細菌が死んでしまったり、細菌の一部が自然に溶解したりした場合は、陰性反応が示されることがよくあります。

第二に、グラム染色反応は細菌の分類と同定にとって重要な特性です。 1884年にデンマークの医師Gr IIによって設立されました。グラム染色は細菌の形態を観察できるだけでなく、すべての細菌を 2 つのカテゴリに分類することもできます。青紫色に染色されたものはグラム陽性細菌と呼ばれ、G+ で表されます。赤色に染色されたもの (対比染色色) はグラム陰性細菌と呼ばれ、G- で表されます。細菌のグラム染色に対する反応が異なるのは、細胞壁の組成と構造が異なるためです。

グラム染色法の手順は次のとおりです。グラム陽性細菌の細胞壁は主にペプチドグリカンが形成するネットワーク構造で構成されています。染色の過程でエタノール処理すると、脱水によりネットワーク構造の細孔サイズが小さくなり、透過性が低下するため、クリスタルバイオレット-ヨウ素複合体は細胞内に保持され、脱色されにくく、青紫色に見えます。グラム陰性細菌の細胞壁はペプチドグリカンの含有量が少なく、脂質物質の含有量が多いです。エタノール処理すると脂質物質が溶解し、細胞壁の透過性が高まるため、クリスタルバイオレット-ヨウ素複合体はエタノールに抽出されやすく、脱色され、対比染色剤（サフラニン）の色で染色されるため、赤色に見えます。